兽医学学科在研项目
时间:2012-12-08 16:00 作者: 来源: 浏览次数:9773

 

1、国家自然科学基金重点项目《中国动物重大疫病分子流行病学研究》:在中国、老挝科技合作中,引进部分国际标准种毒;接受国内送检材料进行诊断、定型、病毒分离及细胞适应性培养和RNA序列分析。为各地动物重大疫病流行病学和预防控制提供了分子病毒学依据。

2、动物重大疫病防疫疫苗的开发与应用:分离、筛选流行毒株12株,并对部分毒株进行基因测序分析,扩充制苗种毒库;建立了病毒抗原蔗糖梯度离心测定病毒146S含量的定量技术;建立了O型抗株捕获ELISA测定技术;优化建立适合病疫苗生产的细胞培养、病毒扩增、病毒灭活、佐剂配方和乳化方法。

3、动物重大疫病分子流行病学及免疫预防学研究:制备猪“O”型动物重大疫病高效苗4万毫升,在上海市供港猪场进行田间试验,免疫猪2万头。对免疫猪进行抽查检验,一次免疫后能产生保护性中和抗体,滴定在1:16-1:64,二次免疫后在1:128以上,无免疫注射反应。与上海防止动物重大疫病办公室合作,在上海进行了猪“O”型动物重大疫病新型合成肽苗(中牧公司)、猪“O”型动物重大疫病灭活苗(中牧公司兰州厂)、猪“O”型动物重大疫病灭活苗(内蒙古生药厂)、猪“O”型动物重大疫病灭活苗(中国农科院兰州兽医研究所)和猪“O”型动物重大疫病基因工程苗(复旦大学)免疫效果比较试验。试验结果显示除合成肽苗在免疫后能产生低能滴度中和抗体(<1:32)外,其他四种疫苗一次和二次免疫后均不能产生有效中和抗体(<1:16)。在上海和昆明应用本项目研制的高效苗同其他疫苗进行不同剂量、不同组合的免疫研究。在昆明完成本试验室高效苗的免疫试验,一次免疫后中和抗体滴度在1:8-1:64之间,二次免疫苗后抗体滴度在1:32-1:512。免疫效果明显优于所有上述的其他疫苗。

4、兽医诊断、检测技术开发研究

项目按计划进行,完成了“O”型、亚洲-I型和“A”型标准毒株,种毒复壮、扩增;完成“O”型动物重大疫病病毒在BHK21细胞和IBRS-2细胞的扩增;进行了“O”型病毒146S蛋白抗原提纯,优化蛋白提纯技术;建立146S蛋白紫外分光定量分析和BSA定量分析和BSA定量分析方法;制备“O”型标准兔和豚鼠高免血清100毫升;制备不同感染时期“O”型参考血清200毫升;建立了“O”型抗原捕获ELISA测定试验,实验结果显示自制兔和豚鼠高免血清与进口英国标准试剂效果完全一致,可以取代进口试剂。

5、牛瘟、牛肺疫小反刍兽疫检测及跨国动物疫病研究

在“中国无牛瘟、牛肺疫、牛海绵状脑病(疯牛病)认证”项目中,自云南、广西、海南和贵州四省采集牛、羊、猪血清样品4600余份,引进了国际标准化诊断试剂,进行牛瘟、小反刍兽疫血清学抗体检测,完成农业部下达年度检测任务,达到了预定目标。

承担制订小反刍兽疫(PPR)、马病毒性动脉炎(EVA)诊断技术国家标准。

6、山羊痘病原的研究:自20028月以来,我省部分市县发生山羊痘流行,使养羊业造成重大损失。先后派员对曲靖、富源、宣威、个旧、石林及昆明等地流行地区进行调查。该病为山羊痘病毒引起的一种接触性传染病,传播迅速,呈地方流行并有蔓延扩散趋势。根据疫情的需要,对本病的流行病学、临床症状、病理学特性进行研究,并分离和鉴定了本病的病原,证实已分离获得XWMYS毒株。制备Goat pox灭活疫苗和弱毒疫苗,试验正在进行中。建立了AGID试验,检测血清样品。

7、口蹄疫病毒基因工程疫苗的研究:以去年构建好的口蹄疫病毒“O”型和“Asia I”型VP1抗原表位表达质粒为基础,通过改进构建,获得6个新的表达质粒,经初步鉴定,其中两个质粒的表达产物抗原性有较大提高。完成抗原表位重复4次的“O”型基因工程疫苗对豚鼠、猪和牛的免疫实验,分别两次接种豚鼠8只、猪5头、牛3头,每周采血并进行微量血清中和实验,结果显示,三种动物所产生的抗体滴度都达到1/32-1/512。完成表位重复4次的“Asia I”型基因工程疫苗的对豚鼠和牛的免疫实验,接种豚鼠8只、牛3头,微量血清中和试验结果显示,抗体滴度达1/32-1/512。正在进行表位重复8次的“O”型基因工程疫苗的对豚鼠和猪的免疫试验,已分别接种豚鼠4只、猪5头。T4噬菌体载体基因工程疫苗的构建:将抗原表位重复2次和4次的“O”型表达质粒进行改造,用T4噬菌体转染,获得重组的表达VP1表位的T4噬菌体2株,目前正在进行豚鼠免疫实验测定其抗原性。

8、家禽疫病防制研究:利用我所技术和设备优势,积极承担省厅下达任务,开展禽病防制研究与技术服务,承担禽流感等家禽重大疫病快速诊断、定型任务,进行流行病学调查、病原分离鉴定及防制措施制定,联系养殖场(户)500余户,检验送检病料3000余份,举办各类培训班30余期,培训各类人员2000余人,发放各类技术资料2万余份,获养殖户好评。

在禽流感研究方面,建立了技术储备。在今年我省爆发流行禽流感时,承担云南禽流感快速诊断任务,在国内率先应用PCR技术准确诊断禽流感,没发生一例误诊,准确率达100%,为政府部门快速决策,采取紧急防治措施提供科学依据,为有效防止疫病扩散蔓延和消除疫情,为我省禽流感防制工作作出了积极贡献。